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新冠疫情下,熒光定量PCR方法核酸DNA檢測(cè)全過程

時(shí)間:2020-06-04 16:21 點(diǎn)擊次數(shù): 更多 熒光定量pcr PCR檢測(cè) pcr檢測(cè)DNA核酸 文章
 
與新冠病毒肺炎疫情做斗爭(zhēng),如何檢測(cè)該病毒是診治防控的重點(diǎn),而核酸檢測(cè)作為病原學(xué)的依據(jù),越來越被大家所關(guān)注。核酸檢測(cè)原理,pcr核酸檢測(cè)步驟?
一、PCR檢測(cè)原理
熒光定量PCR方法的檢測(cè)原理,就是以病毒獨(dú)特的基因序列檢測(cè)靶標(biāo),通過PCR擴(kuò)增,使我們選擇這段靶標(biāo)的DNA序列指數(shù)級(jí)增加,每一個(gè)擴(kuò)增出來的DNA序列,都可與預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號(hào),而測(cè)量累計(jì)的熒光信號(hào),就是確定樣本中是否存在病毒核酸的依據(jù)。

二、PCR檢測(cè)步驟
進(jìn)行核酸檢驗(yàn),需要經(jīng)過取樣、留樣、留存、核酸提取、上機(jī)檢測(cè)五個(gè)步驟。
第一步就是采集人體分泌物,用鼻試子或咽試子擦拭鼻腔或咽后壁及雙側(cè)咽扁桃體處。
第二步醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行留樣,將試子頭浸入細(xì)胞保存液中,折斷尾部后立即旋緊管蓋。
第三部要將樣本放入密閉袋中,保存好并及時(shí)送檢。
第四步將樣本送進(jìn)實(shí)驗(yàn)室,提取核酸。
第五步,將提取物進(jìn)行熒光PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
如果樣本中有病毒,要進(jìn)行RT—PCR,即聚合酶鏈反應(yīng),進(jìn)行基因擴(kuò)增,看在樣本中是否存在病毒RNA,這是目前用的最多的陽性確診方式。不過,核酸檢測(cè)為陽性,為確診病例;為陰性的,也不能完全排除感染,還需要根據(jù)臨床診斷等表現(xiàn)來判斷。

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