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醫(yī)院檢驗科PCR實驗室開展檢測項目之二,基因分型類熒光定量pcr檢測

時間:2020-06-05 16:40 點擊次數: 更多 熒光定量pcr pcr實驗室 PCR檢測 文章
 

PCR實驗室確切的中文名應該是“臨床基因擴增實驗室”。

臨床基因擴增實驗室主要就是利用該項技術來達到檢驗的目的。今天,我們不解釋PCR的原理,只要知道PCR就是通過檢測遺傳物質DNA(或RNA)就足夠了,并且這種方法的特點有:

1、靈敏度高;
2、特異性好;
3、簡單快速。
該項技術從誕生發(fā)展到現在也就幾十年時間,但因為其優(yōu)秀的特點,臨床應用也越來越廣,從病原體的核酸定量檢測、基因分型,擴展到腫瘤基因突變、融合基因檢測等,PCR技術因為其靈敏度比較高,隨之而來的污染問題也是很嚴重的,所以PCR實驗室最重要的工作就是防污染,這其中就包括規(guī)范化實驗室的建設、質量管理體系的建立等等。


PCR技術不但可以大海撈針一樣地尋找DNA,還可以“認出”不同型別的DNA,起到基因分型的作用。

基因分型類pcr檢測:

1.  人CYP2C19基因分型檢測
CYP2C19基因存在至少18種基因多態(tài)性,其中*2型和*3型是中國人群中最常見的兩種等位基因型,分別為CYP2C19基因c.681G>A和c.636G>A的點突變。這些點突變引起CYP2C19基因編碼的酶活性喪失,代謝底物的能力減弱,從而引起相關藥物代謝的個體化差異,導致相關藥物對于不同患者的療效明顯不同。
臨床常用藥物包括氯吡格雷、伏立康唑、質子抑制劑類藥物、抗抑郁類藥物、以及抗癲癇類藥物等。通過檢測患者CYP2C19基因型,判斷患者代謝速率類型,合理調整用藥劑量,是提高相關疾病治愈率,減少毒副作用的有效途徑。

2.  人CYP2C9與VKORC1基因分型檢測
臨床常用的抗凝藥華法林由CYP2C9代謝而其突變體使華法林代謝速率大大降低,用藥個體在使用初期就有較高的出血危險性。人VKORC1基因具有遺傳多態(tài)性,其編碼的維生素K氧化還原酶是華法林的作用靶點,VKORC1啟動子的基因多態(tài)性(-1639G/A)是影響華法林需求劑量個體差異的最主要因素。
GG基因型的個體需要較高劑量的華法林才能達到抗凝效果;而AA基因型的個體只需要很少劑量的華法林就能達到抗凝效果,過量的華法林會導致溶血等嚴重副反應。

3.  乙型肝炎病毒基因分型檢測
HBV亞型的類別與HBV的致病性、臨床表現及抗病毒藥物治療的選擇都有一定的相關性。感染C型的患者肝臟損傷程度比B型嚴重,發(fā)生肝硬化及肝癌可能性更大,HBV D 型與多種嚴重肝病如肝硬化及肝細胞癌密切相關。而感染B型的患者對干擾素治療有著更好的應答。因此臨床上檢測乙肝病毒亞型及耐藥突變對及時調整治療方案、指導臨床用藥及實時監(jiān)控抗病毒藥物療效具重要的指導意義。

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