蛋白純化標(biāo)簽應(yīng)該如何選擇？

在進行蛋白表達時，選擇合適的標(biāo)簽有利于蛋白的純化，促進蛋白的可溶性，因此了解幾種常用的蛋白純化標(biāo)簽很重要。
一般來說，常用的蛋白純化標(biāo)簽主要有His tag、GST tag、MBP tag、NusA tag、Strep tag，那么這些蛋白純化標(biāo)簽有什么不同之處呢？
His tag（組氨酸標(biāo)簽）融合蛋白是目前最常見的表達方式，其優(yōu)點是標(biāo)簽小，純化步驟簡便，純化條件溫和，能純化可溶性/包涵體蛋白，一般不會影響蛋白的功能結(jié)構(gòu)，且可以產(chǎn)出大量的目標(biāo)蛋白，但該標(biāo)簽不適合易氧化蛋白或膜蛋白的純化。

GST tag（谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶）的洗脫條件溫和，有助于保持蛋白功能活性，適合pull-down 檢測，具有很好的線性動態(tài)范圍，但分子量較大，可能會影響蛋白質(zhì)的功能和下游實驗，如果蛋白不可溶，很難用變性的方法進行純化。

MBP tag（麥芽糖結(jié)合蛋白標(biāo)簽）可以減少目標(biāo)蛋白的降解，增加蛋白的表達量和穩(wěn)定性，提高表達產(chǎn)物的水溶性，但標(biāo)簽較大，對蛋白的結(jié)構(gòu)和功能會有一定影響。
NusA tag（轉(zhuǎn)錄終止/抗終止蛋白標(biāo)簽）不具有獨立的純化標(biāo)簽功能，需要和其他標(biāo)簽（如His標(biāo)簽）聯(lián)用，可提高蛋白質(zhì)的溶解性，但由于分子量較大，對蛋白下游應(yīng)用會有影響。
Strep tag（strep標(biāo)簽）能產(chǎn)出高純度（95%）的目標(biāo)蛋白，且能保持目標(biāo)蛋白活性，主要是因其純化流程溫和。其次，能進行變性條件下的純化。在用于WB/ELISA，可偵測目標(biāo)蛋白。另外，還可固定目標(biāo)蛋白，檢測蛋白質(zhì)交互作用，或更進一步用以篩選治療用蛋白質(zhì)，或是工業(yè)用酵素。但Strep tag純化系統(tǒng)的價格相對His tag而言較高，所產(chǎn)出的目標(biāo)蛋白數(shù)相對較少。

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