英文：Venor®Gem qEP
品牌：
MB貨號(hào)：
11-9025規(guī)格：
25次/盒用途：
用于【細(xì)胞和生物制品】及其生產(chǎn)過程中【支原體】污染的檢測(cè)
特點(diǎn)
1. 內(nèi)控對(duì)照為獨(dú)立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。
2. 高特異性，一次檢測(cè)即可涵蓋所有常見易感染細(xì)胞的支原體物種（包括歐洲藥典規(guī)定的9種支原體）。與細(xì)菌和真核DNA無交叉反應(yīng)。
3. 高靈敏度，最高檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml。
4. 有相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA，便于特異性驗(yàn)證。
5.有相應(yīng)配套的支原體絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品，便于最后定量檢測(cè)。
操作步驟
第1步：樣本處理
a.細(xì)胞培養(yǎng)上清
b. 生物藥或需遵循藥典的樣本
說明：①樣品基質(zhì)可能會(huì)影響檢測(cè)的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測(cè)定靈敏度。
②細(xì)胞培養(yǎng)物樣本含豐富的DNA酶，在低溫下也能降解支原DNA，影響檢測(cè)靈敏度。建議：樣本做DNA 抽提處理，實(shí)現(xiàn)最高靈敏度。
推薦：德國(guó)MB公司生產(chǎn)的專用支原體DNA提取試劑盒
Venor® Gem Sample Preparation Kit
該DNA抽提試劑盒已經(jīng)過廣泛驗(yàn)證。
第2步：試劑制備
a. 凍干粉溶解
b. 反應(yīng)體系制備
b1) 樣品為細(xì)胞上清篩查——反應(yīng)體系制備
b2) 樣品為生物藥——反應(yīng)體系制備
第3步：?jiǎn)?dòng)熒光定量
PCR儀
第4步：結(jié)果判別
FAM通道：檢測(cè)支原體熒光信號(hào)。HEX通道：檢測(cè)內(nèi)控對(duì)照熒光信號(hào)。
支原體DNA和內(nèi)控DNA存在信號(hào)的競(jìng)爭(zhēng)性抑制。
支原體DNA越多，F(xiàn)AM通道信號(hào)越高，檢測(cè)內(nèi)控對(duì)照的HEX通道信號(hào)越低。
定量需基于Ct值和DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線。
Ct＜40為陽性結(jié)果。Ct≥40為陰性結(jié)果。
示意圖：
儲(chǔ)存條件
2~8℃保存至少12個(gè)月。復(fù)溶后-18℃以下保存。
