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【學(xué)術(shù)探討】使用蛋白A免疫吸附方法快速大量制備痊愈患者體內(nèi)抗體用于新型冠狀病毒肺炎患者的治療

時(shí)間:2020-06-22 22:27 點(diǎn)擊次數(shù): 更多 重組蛋白 文章
 新型冠狀病毒(2019-nCoV)引發(fā)的肺炎疫情仍在持續(xù)進(jìn)展,針對(duì)新型冠狀病毒(2019-nCoV)的治療藥物難以在短時(shí)間內(nèi)研發(fā)出來。已經(jīng)痊愈的患者,其體內(nèi)存在大量針對(duì)2019-nCoV的特異性抗體,能否提取這些抗體用于治療?在SARS期間就曾應(yīng)用康復(fù)患者的血漿來治療感染的病人[1],但在臨床推廣應(yīng)用卻存在技術(shù)困難,一是血漿成分復(fù)雜,安全性難以保證;二是需要的血漿量很大,實(shí)際難以大量實(shí)施該治療方法[2]。
能否找到一種可以快速大量制備痊愈患者體內(nèi)特異性抗體的方法?本文從以下幾個(gè)方面進(jìn)行探討。

一、大量的研究及臨床應(yīng)用表明[3,4]:

1、使用針對(duì)病毒的特異性抗體,能有效地殺死病毒,是治療病毒感染疾病的有效方法。從治愈患者體內(nèi)分離出特異性抗體,再注射到同樣病毒感染患者的體內(nèi),是最直接、最快速和最有效的治療方法。
2、已治愈的病毒感染的患者,體內(nèi)含有大量的針對(duì)該感染病毒的特異性抗體,并可持續(xù)半年左右的時(shí)間。治愈患者淋巴細(xì)胞能持續(xù)產(chǎn)生特異性抗體,如果能將該抗體分離出來,能很好地應(yīng)用于同樣病毒感染患者的治療。
3、蛋白A免疫吸附能快速、大量地從治愈患者體內(nèi)分離出抗病毒特異性抗體,而又不會(huì)對(duì)該患者造成傷害。

二、蛋白A免疫吸附分離制備免疫球蛋白的原理

1、分離原理:蛋白A免疫吸附柱中的重組蛋白A分子可以選擇性結(jié)合人體免疫球蛋白,然后通過酸性溶液將免疫球蛋白從吸附柱上洗脫并收集。具體步驟如下:
(1)通過體外循環(huán),將血液從體內(nèi)導(dǎo)出,經(jīng)血漿分離器,把血細(xì)胞與血漿分開,血漿再經(jīng)過蛋白A免疫吸附柱,該吸附柱能選擇性地吸附血漿中的免疫球蛋白,經(jīng)過血漿分離器和蛋白A免疫吸附柱后的血漿和血細(xì)胞會(huì)合后再回輸入體內(nèi)。
(2)被吸附在蛋白A免疫吸附柱上的免疫球蛋白通過酸性緩沖液洗脫下來,收集并中和后,即可獲得含抗病毒的特異性免疫球蛋白溶液。
(3)吸附柱用中性緩沖液沖洗并恢復(fù)至中性后,可以恢復(fù)吸附能力,繼續(xù)從血漿中吸附免疫球蛋白。
(4)如此循環(huán)操作,即可制備大量的免疫球蛋白。
制備過程示意圖如下所示:

2、該制備方法的優(yōu)點(diǎn):
(1)對(duì)人體沒有傷害。供體(志愿者)不會(huì)丟失除免疫球蛋白以外的任何血液成分,被吸附出來的含有抗病毒特異性抗體的免疫球蛋白,可以通過輸入正常人丙種球蛋白得以補(bǔ)充。因此,不會(huì)對(duì)患者造成傷害。
(2)可以快速、大量制備免疫球蛋白。是目前分離制備免疫球蛋白最好的方法。5-6小時(shí)內(nèi)可以在每個(gè)人(志愿者)體內(nèi)分離出15-20克免疫球蛋白。每個(gè)人(志愿者)每周可以分離1-2次,不會(huì)對(duì)身體造成影響。
(3)和常規(guī)收集血漿再制備免疫球蛋白的方法相比,該方法不受血漿量的限制,可以反復(fù)多次制備,快速應(yīng)對(duì)疫情需要。
參考文獻(xiàn):
1.    央視新聞客戶端 2020年01月30日 01:37。新聞1+1丨康復(fù)者是否還會(huì)傳染別人?專家:有抗體,一般不再傳染。http://m.news.cctv.com/2020/01/30/ARTImY8HMZeVbyAYzaxAwRyS200130.shtml.
2.    ”中國(guó)科普博覽“公眾號(hào)(kepubolan)。多位新冠肺炎患者治愈出院,為什么不提取他們血液中的抗體用于治療https://tech.163.com/20/0131/12/F47HSOLV000999LD.html
3.    Luke T, et al. Fully Human Immunoglobulin G From Transchromosomic Bovines Treats Nonhuman Primates Infected With Ebola Virus Makona Isolate. J. Infect. Dis. 2018 11 22;218
4.    Liang MF, et al. SARS Patients-derived Human Recombinant Antibodies to S and M Proteins Efficiently Neutralize SARS-Coronavirus Infectivity. Biomed. Environ. Sci. 2005 Dec;18(6)

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